革兰染色法，革兰氏染色的步骤和原理?

革兰氏染色的步骤和原理?

原理：革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 步骤： (一)涂片固定 在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。 (二)染色 在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液，染色液应完全覆盖整个菌膜，染色1min。 (三)水洗 染色到一定的时间，拿住玻片使之成450角，用细小的水流把多余的染料冲洗掉，被菌体吸附的染料则保留。 (四)媒染 加碘液覆盖涂面染1 min。在媒染处理时，媒染剂与染料形成不溶性的化合物，可增加染料和细菌的亲和力。 (五)水洗，用吸水纸吸去水分 用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。 (六)脱色 加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色， 20 s~30 s后再进行水洗，吸去水分。 (七)复染 蕃红染色液染色10 s后， 自来水冲洗。 (八)干燥，镜检 染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。 扩展资料 标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个： (1)杀死微生物，固定细胞结构。 (2)保证菌体能更牢固的粘附在载玻片上，防止标本水洗时被水冲洗掉。 (3)改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。

革兰氏染色的关键步骤是什么?

关键步骤如下： 1. 菌株接种：将菌株接种到新鲜的培养基中，以获得菌液。 2. 抽提培养液：用离心机抽提出培养液，以消除培养基中的细菌。 3. 抽提染色液：用离心机抽提出染色液，以消除培养液中的蛋白质和其他杂质。 4. 染色：将抽提的染色液混合到菌液中，摇晃均匀，以获得染色结果。 5. 观察结果：将染色的结果观察，以检测菌株的鉴定结果。

革兰氏染色的步骤及结果对照?

革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，用于区分革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。以下是革兰氏染色的步骤及其结果对照： 步骤： 1. 取一枚无菌玻璃片（或称为载玻片），将待染菌液滴于玻璃片上。 2. 用火培养架将玻璃片持在火焰上加热，直到液体完全干燥。 3. 将加热干燥的玻璃片放入革兰染色剂的第一瓶中（革兰碘复合物）浸泡1分钟，固定细菌细胞壁的颜色。 4. 用水冲洗玻璃片，以去除多余的革兰碘复合物。 5. 将玻璃片浸入第二瓶革兰染色剂（乙醇/乙醚溶液）中，颜色溶剂可以用酒精代替，浸泡30秒钟。此步骤将从革兰阴性细菌中去除革兰碘复合物。 6. 快速用水冲洗玻璃片，以停止乙醇/乙醚的作用。 7. 将玻璃片浸入第三瓶革兰染色剂（丽春红溶液）中，浸泡1分钟，使革兰阳性细菌细胞壁染成红色。 8. 用水冲洗玻璃片，使多余的染色剂冲洗掉。 9. 用纸巾轻轻地将玻璃片吹干，然后可以在显微镜下观察染色结果。 结果对照： - 革兰阳性细菌：染色后的细菌呈紫色或暗紫色，这是由于细菌细胞壁的多层胞壁结构保留了革兰染色剂。 - 革兰阴性细菌：染色后的细菌呈红色或粉红色，这是由于细菌细胞壁较薄，无法保留革兰染色剂，但靠着后来的丽春红染色剂染色。 需要注意的是，染色结果可能会受到染色时间和操作技术的影响，因此对照样本的选择以及正确的染色步骤对于获得准确的结果是至关重要的。

革兰染色步骤及结果对照 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）蒸馏水冲洗。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。 结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别。 现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。

革兰氏染色原理及步骤?

一、革兰氏染色的原理 1、G＋细胞壁主要由肽聚糖形成的致密网状结构组成，壁厚，类脂含量低，交联度高，用乙醇处理后，发生脱水作用，肽聚糖层孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留再细胞内，故细菌仍保留初染时的紫色。 2、G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多类脂质，故用乙醇处理后，类脂质被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞被脱色，经沙黄复染后呈红色。 二、革兰氏染色的步骤 1、制片 涂片——干燥——固定 2、初染 滴加结晶紫染色1~2分钟，水洗； 3、媒染 用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟； 4、脱色 滴加95%酒精，脱色30秒，立即水洗； 5、复染 用番红液复染1~2分钟，水洗； 6、镜检 干燥后，用油镜观察。先低倍镜再高倍镜。油镜使用结束后，要及时用擦镜纸擦干净镜头，避免香柏油残留。

革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。 经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。染色原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。

革兰染色的步骤与结果?

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。 结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。 它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。 扩展资料 阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同pH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。所以染色时的染色液pH和染色时间等条件要严格控制。 例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应； pH很低时，则都可呈负反应。此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫-碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。所以脱色时间、脱色方法也应严格控制。

革兰染色是什么颜色?

革兰染色阳性一般是白色。大多数化脓性球菌都属于革兰式阳性菌，通过产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多数为革兰氏阴性菌，可以产生内毒素使人致病。 革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖构成，常见的有葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等，对青霉素比较敏感，因此区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌在选用抗生素方面意义重大。